Os estudos sobre os efeitos citotóxicos atribuídos ao uso de agentes de união adesivo no tecido pulpar não são conclusivos. Para determinar se esses materiais são seguros para uso clínico, a exposição in vivo da polpa dentária a agentes de união adesiva foi simulada por meio de uma configuração experimental na qual as células-tronco da polpa dentária humana (hDPSC) são expostas à ação de dois tipos de adesivos: adesivos autocondicionantes e agentes de união de duas etapas por meio de uma barreira de dentina. Os efeitos citotóxicos nessas células foram avaliados pelo protocolo de ensaio MTT e microscopia de fluorescência, e seus resultados foram contrastados com os obtidos por meio de espectros Raman obtidos em hDPSCs individuais. De modo geral, não foram observados efeitos citotóxicos significativos com a combinação de todas as técnicas, e a viabilidade celular próxima a 90% foi obtida para uma barreira de dentina de pelo menos 1 mm de espessura. Além disso, a espectroscopia Raman foi capaz de detectar danos estruturais ao DNA em algumas células da polpa dentária quando expostas a agentes de colagem de duas etapas, sugerindo que essa técnica poderia ser considerada uma ferramenta complementar com potencial para avaliar a toxicidade celular além da viabilidade celular.
Autoria
person Antonella Castellanos Caroprese
schoolCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., ColombiaPontificia Universidad JaverianaColombiaBogotá, D.C, ColombiaCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., Colombia
person Alexa Nicolle Chinchilla Navarrete
schoolCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., ColombiaPontificia Universidad JaverianaColombiaBogotá, D.C, ColombiaCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., Colombia
person Sandra Janeth Gutiérrez Prieto
schoolCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., ColombiaPontificia Universidad JaverianaColombiaBogotá, D.C, ColombiaCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., Colombia
person Jean Carlos Villamil
schoolCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., ColombiaPontificia Universidad JaverianaColombiaBogotá, D.C, ColombiaCentro de Investigaciones Odontológicas, Facultad de Odontología, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., Colombia
person Octavio Alejandro Castañeda Uribe
person Juan Carlos Salcedo Reyes
schoolGrupo de Películas delgadas y Nanofotónica, Departamento de Física, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., ColombiaPontificia Universidad JaverianaColombiaBogotá, D.C, ColombiaGrupo de Películas delgadas y Nanofotónica, Departamento de Física, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., Colombia
person And Henry Alberto Méndez Pinzón
schoolGrupo de Películas delgadas y Nanofotónica, Departamento de Física, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., ColombiaPontificia Universidad JaverianaColombiaBogotá, D.C, ColombiaGrupo de Películas delgadas y Nanofotónica, Departamento de Física, Pontificia Universidad Javeriana, BogotáD.C., Colombia
Correspondence: Henry Alberto Méndez Pinzón; Address: Pontificia Universidad Javeriana, Departamento de Física, Carrera 7 No. 43-82 Edificio 52 Oficina 606, Bogotá (Colombia) ; Phone: +57(1) 3208320 / 4044, E-mail address:
hmendez@javeriana.edu.co
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Figuras | Tabelas
imageFigure 1 Experimental design for simulating exposure of dental pulp to adhesive agents in clinical practice: a) Diagram of cutting area of dentin discs in molars. b) a Real dentine disc image and their placement as a barrier between adhesive agents and cell culture and c) a Picture showing a 12.0 mm diameter dentin disc fixed to the transwell. open_in_new

imageFigure 2 Scanning Electron Microscopy (SEM) images of a dentine disc: a) Smear layer on the occlusal surface (1000X) and b) Under 10.0 kX. The structure and morphology of dentine debris within the smear layer are observed. open_in_new

imageFigure 3 Monolayer of hDPSC under an inverted microscope (40x). open_in_new

imageFigure 4 SERS substrates elaborated by deposition of a metallic layer on colloidal crystals (CC). a) SEM image of FCC colloidal crystal grown by stacked 250 nm Silica spheres. b) Structure of the SERS substrate with a 50 nm thickness gold layer on top (Ref. 24). open_in_new

imageBox 1 Protocol established by the manufacturers for the application of adhesives on dentine discs open_in_new

imageFigure 5 SEM images at the dentine/adhesive interface. a) Self-etching adhesive Single Bond Universal 3M™. b) Two-step adhesive Adper single bond 3M™. open_in_new

imageFigure 6 Representative normalized Raman Spectrum of hDPSC open_in_new

imageFigure 7 Raman spectra of hDPSC a) with no adhesive applied (control) and under exposure to the adhesives: b) Single bond universal, c) Optibond all in one, and d) Adper single bond. open_in_new

imageFigure.8. Renormalized spectra of the two-step adhesive Adper single bond 3M™ and the control spectrum taking the Adenine, Guanine band as reference. open_in_new

imageFigure 9 Images of Fluorescence emitted by hDPSC after exposure to adhesives: Single bond universal (a,b), Optibond all in one (c,d), and Adper single bond (e,f). open_in_new

table_chartTable 1
Relative intensities of most prominent Raman bands of hDPSC after being exposed to three different adhesives
| Adhesive exposure | Relative intensity of Raman Bands | ||
|---|---|---|---|
| C-H Phenyl | PO2 - | G, A | |
| No adhesive (Control) | 0.39 ± 0.08 | 0.68 ± 0.11 | 0.29 ± 0.06 |
| Single Bond Universal 3M™ | 0.36 ± 0.02 | 0.72 ± 0.03 | 0.26 ± 0.05 |
| Opti bond All In One Kerr™ | 0.39 ± 0.02 | 0.72 ± 0.04 | 0.28 ± 0.04 |
| Adper single bond 3M™ | 0.55 ± 0.02 | 0.86 ± 0.07 | 0.42 ± 0.15 |
table_chartTable 2
Summary of cell viability estimated by MTT test and confocal fluorescence microscopy.
| Adhesive | Method | ||
|---|---|---|---|
| Fluorescence | MTT assay | Total | |
| No adhesive (Control) | 97.3 ± 2.8% | 104.9 ± 5.3% | 102.8 ± 5.8% |
| Single Bond Universal 3M™ | 98.9 ± 1.1% | 102.0 ± 9.1% | 100.1 ± 6.0% |
| Opti bond All In One Kerr™ | 93.6 ± 2.7% | 100.5 ± 6.6% | 97.7 ± 6.4% |
| Adper single bond 3M™ | 95.3 ± 3.3% | 101.4 ± 6.4% | 98.9 ± 6.2% |
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