O presente estudo analisou a expressão de proteínas envolvidas na via de sinalização Sonic Hedgehog (SHH, SMO e GLI-1) em lesões benignas do epitélio odontogênico de comportamento biológico distintos, tais como ceratocistos odontogênicos (CO), ameloblastomas (AMB) e tumores odontogênicos adenomatoides (TOA), com o intuito de identificar o papel destas proteínas na patogênese destas lesões. A amostra foi constituída de 20 CO, 20 AMB e 10 TOA, analisada pela técnica da imuno-histoquímica de forma semiquantitativa por compartimento celular, onde foi feita uma análise da membrana e citoplasma das células nas proteínas SHH e SMO, enquanto que para a proteína GLI-1, foi feita uma análise nuclear e/ou citoplasmática. Para análise estatística, foram utilizados os testes de Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) e Spearman (r), com o nível de significância estabelecido em 5% (p < 0,05). Ao analisar a proteína SHH, observou-se que o AMB demonstrou expressão membranar/citoplasmática significativamente maior em comparação ao TOA (p = 0,022) e CO (p = 0,020). Com relação à análise membranar/citoplasmática da SMO, não foram identificadas diferenças entre as lesões estudadas. Para a proteína GLI-1, foram constatadas diferenças estatisticamente significativas, em nível nuclear, para o AMB e CO em comparação ao TOA (p< 0,0001). Além disso, foram observadas correlações positivas com significância estatística entre GLI-1 citoplasmático e GLI-1 nuclear para o AMB (r = 0,482; p = 0,031) e CO (r = 0,865; p< 0,0001), e entre o SMO membranar/citoplasmático e o GLI-1 citoplasmático para o TOA (r = 0,667; p = 0,035) e o CO (r = 0,535; p = 0,015). Os resultados deste estudo confirmam a participação da via de sinalização Sonic Hedgehog na patogênese das lesões estudadas e, a superexpressão de SHH em AMBs e GLI-1 nuclear em AMBs e COs, indica que estas proteínas contribuem com o comportamento biológico mais agressivo destas duas lesões quando comparado ao TOA.
Article • Braz. Dent. J. 33
(5)
• Sep-Oct 2022 • https://doi.org/10.1590/0103-6440202204972 linkcopiar
Immunohistochemical analysis of SHH, SMO and GLI-1 proteins in epithelial odontogenic lesions
Autoria
person Katianne Soares Rodrigues
schoolDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, BrazilFederal University of Rio Grande do NorteBrazilNatal, Rio Grande do Norte, BrazilDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, Brazil
person Hellen Bandeira de Pontes Santos
schoolDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, BrazilFederal University of Rio Grande do NorteBrazilNatal, Rio Grande do Norte, BrazilDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, Brazil
person Everton Freitas de Morais
schoolDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, BrazilFederal University of Rio Grande do NorteBrazilNatal, Rio Grande do Norte, BrazilDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, Brazil
person Roseana de Almeida Freitas
schoolDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, BrazilFederal University of Rio Grande do NorteBrazilNatal, Rio Grande do Norte, BrazilDepartment of Oral Pathology, Federal University of Rio Grande do Norte, Natal, Rio Grande do Norte, Brazil
Correspondence: Dr.ª Roseana de Almeida Freitas; Universidade Federal do Rio Grande do Norte - Programa de Pós-Graduação em Ciências Odontológicas. Av. Senador Salgado Filho, 1787 - Lagoa Nova, Natal/RN, Brasil. CEP 59056-000; Phone/Fax: +55 84 3215-4138, E-mail:
roseanafreitas@hotmail.com
roseanafreitas@hotmail.com
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Figuras | Tabelas
imageFigure 1 Immunoexpression of SHH, SMO and GLI-1 proteins in odontogenic keratocyst (OKC), ameloblastoma (AB), and adenomatoid odontogenic tumor (AOT) (magnification 400×). (A) Membrane/cytoplasmic expression only in the basal layer of the epithelial lining of OKC. (B) high membrane/cytoplasmic expression in AB. (C) Intermediate staining of the protein only at the membrane/cytoplasmic level in AOT. (D) high cytoplasmic/membrane expression, except for the superficial cell layer of the epithelium in OKC. (E) Intense cytoplasmic/membrane immunostaining in AB. (F) high staining only in the membrane/cytoplasmic compartments of AOT. (G) high nuclear expression, except for the superficial cell layer of the cystic epithelium in OKC. (H) Nuclear immunostaining in nests of the odontogenic epithelium in AB. (I) high and indistinct immunohistochemical expression only in the cytoplasm of AOT. open_in_new

table_chartTable 1
Frequency of cases of ABs, AOTs and OKCs according to gender, age and anatomical location.
| Injury/Variable | Total n (%) |
|---|---|
| Ameloblastoma | |
| Sex | |
| Female | 11 (55.0) |
| Male | 9 (45.0) |
| Age | |
| Average (±SD) | 30.05 (±21.00) |
| Location | |
| Mandible | 16 (80.0) |
| Maxilla | 4 (20.0) |
| Adenomatoid Odontogenic Tumor | |
| Sex | |
| Female | 6 (60.0) |
| Male | 4 (40.0) |
| Age | |
| Average (±SD) | 16.80 (±12.99) |
| Location | |
| Mandible | 3 (30.0) |
| Maxilla | 7 (70.0) |
| Odontogenic keratocysts | |
| Sex | |
| Female | 8 (40.0) |
| Male | 12 (60.0) |
| Age | |
| Average (±SD) | 32.10 (±12.52) |
| Location | |
| Mandible | 17 (85.0) |
| Maxilla | 3 (15.0) |
-
Abbreviations: OKCs, Odontogenic keratocysts; AOTs, Adenomatoid Odontogenic Tumors; ABs, Ameloblastomas; SD, Standard deviation.
table_chartTable 2
Sample size, median, quartiles 25 and 75, mean of the ranks, Kruskal-Wallis statistic and statistical significance (p) for SHH, SMO and GLI-1 immunolabeling scores in relation to the groups.
| Location/Injury | n | Median | Q 25 -Q 75 | Average posts | KW | p |
|---|---|---|---|---|---|---|
| SHH | ||||||
| Cytoplasm/Membrane | ||||||
| AB | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 32.38 | 9.029 | 0.011* |
| AOT | 10 | 1.00 | 0.00-2.25 | 17.65 | ||
| OKC | 20 | 1.50 | 1.00-2.00 | 22.55 | ||
| SMO | ||||||
| Cytoplasm/Membrane | ||||||
| AB | 20 | 3.00 | 3.00-3.00 | 26.0 | 0.742 | 0.690 |
| AOT | 10 | 3.00 | 2.75-3.00 | 23.5 | ||
| OKC | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 26.0 | ||
| GLI-1 | ||||||
| Cytoplasm | ||||||
| AB | 20 | 3.00 | 3.00-3.00 | 26.33 | 1.313 | 0.519 |
| AOT | 10 | 3.00 | 3.00-3.00 | 27.55 | ||
| OKC | 20 | 3.00 | 2.25-3.00 | 23.65 | ||
| Nuclear | ||||||
| AB | 20 | 2.00 | 1.00-3.00 | 27.10 | 22.778 | <0.0001* |
| AOT | 10 | 0.00 | 0.00-0.00 | 7.50 | ||
| OKC | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 32.90 |
-
*Statistically significant (p < 0.05).
-
Abbreviations: AB, Ameloblastoma; AOT, Adenomatoid Odontogenic tumor; OKC, Odontogenic Keratocyst; KW: Kruskal-Wallis. Score: 0 = absence of staining, 1 = 0 to 10% of positive cells (low), 2 = 11 to 50% of positive cells (intermediate), and 3 ≥ 50% of positive cells (high).
table_chartTable 3
Sample size, median, quartiles 25 and 75, mean of the ranks, Mann-Whitney statistic and statistical significance (p) for SHH and GLI-1 immunolabeling scores in relation to the groups when analyzed two-by-two.
| Location/Injury | n | Median | Q 25 -Q 75 | Average posts | U | p |
|---|---|---|---|---|---|---|
| SHH (Cytoplasm/Membrane) | ||||||
| AB | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 18.10 | 48.0 | 0.022* |
| AOT | 10 | 1.00 | 0.00-2.25 | 10.30 | ||
| AB | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 24.78 | 114.5 | 0.020* |
| OKC | 20 | 1.50 | 1.00-2.00 | 16.23 | ||
| OKC | 20 | 1.50 | 1.00-2.00 | 16.83 | 73.5 | 0.248 |
| AOT | 10 | 1.00 | 0.00-2.25 | 12.85 | ||
| GLI-1 (Nuclear) | ||||||
| AB | 20 | 2.00 | 1.00-3.00 | 20.00 | 10.0 | <0.0001* |
| AOT | 10 | 0.00 | 0.00-0.00 | 6.50 | ||
| AB | 20 | 2.00 | 1.00-3.00 | 17.60 | 142.0 | 0.121 |
| OKC | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 23.40 | ||
| OKC | 20 | 3.00 | 2.00-3.00 | 20.00 | 10.0 | <0.0001* |
| AOT | 10 | 0.00 | 0.00-0.00 | 6.50 |
-
*Statistically significant (p < 0.05).
-
Abbreviations: AB, Ameloblastoma; AOT; Adenomatoid Odontogenic Tumor; OKC, odontogenic keratocyst; U, Mann-Whitney. Score: 0 = absence of staining, 1 = 0 to 10% of positive cells (low), 2 = 11 to 50% of positive cells (intermediate), and 3 ≥ 50% of positive cells (high).
table_chartTable 4
Spearman’s correlation coefficient (r) and statistical significance (p) of the immunoexpressions.
| Comparison | Ameloblastoma (n = 20) | Adenomatoide odontogenic tumor (n = 10) | Odontogenic keratocyst (n = 20) | |||
|---|---|---|---|---|---|---|
| r | p | r | p | r | p | |
| SHH (C/M) × SMO (C/M) | 0.369 | 0.110 | 0.629 | 0.052 | -0.162 | 0.494 |
| SHH (C/M) × GLI-1 (C) | 0.189 | 0.426 | 0.419 | 0.228 | -0.017 | 0.944 |
| SHH (C/M) × GLI-1 (N) | 0.186 | 0.433 | - | - | -0.088 | 0.711 |
| GLI-1 (N) × SMO (C/M) | 0.423 | 0.063 | - | - | 0.391 | 0.088 |
| GLI-1 (C) × GLI-1 (N) | 0.482 | 0.031* | - | - | 0.865 | <0.0001* |
| GLI-1 (C) × SMO (C/M) | 0.327 | 0.160 | 0.667 | 0.035* | 0.535 | 0.015* |
-
*Statistically significant (p < 0.05). Abbreviations: C, Cytoplasm; M, Membrane; N, Nuclear.
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