INFECÇÃO POR SALMONELLA TYPHIMURIUM EM ARARA AZUL (ANODORHYNCHUS HY ACINTHINUS)RESUMO
Foram apreendidas 12 araras azuis (Anodorhynchus hyacinthinus) no Aeroporto Internacional de Guarulhos, SP, sendo que quatro destas estavam mortas na caixa utilizada para o embarque ilegal. As outras aves foram encaminhadas ao Parque Ecológico do Tietê-DAEE para readaptação e soltura. Ao exame clínico observou-se que as aves estavam debilitadas. Após dez dias, um dos espécimes veio a óbito, sendo então necropsiado no Departamento de Patologia/FMVZ/USP. As lesões encontradas eram sugestivas de salmonelose aviária, sendo então coletados fragmentos de fígado, baço, rim, pulmão e cérebro para exame histopatológico. Fragmentos de baço e fígado foram também coletados para exame bacteriológico, sendo cultivados em caldo BHI e caldo tetrationato a 37°C por 24 horas e cultivados em ágar sangue e Mac Conkey, obtendo-se então dois tipos de colônias lactose negativa e acinzentadas que foram, em seguida, submetidas a testes bioquímicos, sendo caracterizadas como Salmonella spp. A amostra foi encaminhada ao Instituto Adolfo Lutz, SP, para sorotipagem e identificada como Salmonella Typhimurium. Foi realizado o teste de susceptibilidade a drogas antimicrobianas e a amostra mostrou-se resistente somente à tetraciclina. Estas aves foram então tratadas com Danofloxacina à 5 mg/kg PV por 5 dias. Posteriormente foram realizadas duas coproculturas (swabs cloacais) no período de dois e vinte e três dias após o término do tratamento, sem o isolamento de Salmonella spp.
PALAVRAS-CHAVE:
Salmonella Typhimurium; salmonelose; arara azul; resistência a antibióticos; Anodorhynchus hyacintinus.
ABSTRACT
Twelve blue macaws (Anodorhynchus hyacinthinus) were apprehended at the International Airport of Guarulhos, in São Paulo, Brazil. Four birds had died inside the cage used for the illegal transportation. The other fowls were taken to the Tietê Ecological Park - DAEE, for re-adaptation and freeing. Clinicai examination showed the birds were debilitated. One of the specimens died after ten days and was taken to the Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo - FMVZ/USP- for necropsy. Lesions found suggested avian salmonellosis. Therefore, liver, spleen, kidney, lung and brain fragments were collected for hystopathologic examination. Likewise, spleen and liver fragments were collected for bacteriological exams, cultivated in BHI broth and tetrathionate broth at 37°C, for 24 hours, and cultured in both Mac Conkey and blood agar. Negative lactose colonies and grayish colonies were found. They were then submitted to biochemical tests and were characterized as Salmonel/a spp. The sample was sent for serotyping at the Adolfo Lutz Institute, in São Paulo, and identified as Salmonella Typhimurium. Susceptibility tests to antimicrobial drugs were performed, and the sample proved resistant only to tetracycline. The birds were then treated with Danofloxacina 5 mg/kg PV, for five days. Afterwards, two coprocultures (cloacal swabs) were accomplished on day 02 and 23 post end of treatment, with no Salmonella spp. isolation.
KEY WORDS:
Salmonella Typhimurium; salmonelosis; hyacinth macaw; antibiotic resistance; Anodorhynchus hyacintinus.
INTRODUÇÃO
O tráfico indiscriminado geralmente culmina com o envio de animais doentes que carreiam agentes infecciosos patogênicos como as salmoneloses para outros países.
Esta enfermidade tem importância econômica mundial e pode apresentar-se clinicamente sob diferentes síndromes (ASHTON, 1990). Outros sorotipos de Salmonella que não aqueles contidos no subgênero S. arizonae, são referidos como salmonelas paratifóides. ESTPS organismos podem infectar uma grande variedade de hospedeiros, inclusive o homem, em alguns casos resultando em reservatórios assintomáticos e em outros produzindo sinais clínicos (GASR, 1997). As aves são consideradas o veículo mais comum para salmoneloses humanas (TAUXE, 1991). Encontradas em todas as partes do mundo, as salmonelas infectam e são transportadas por uma grande variedade de hospedeiros, incluindo o homem, animais silvestres edomésticos. Informações sobre a incidência e distribuição do sorotipo de salmonelas na população de animais domésticos são essenciais para se relacionar os possíveis reservatórios que possam ser responsáveis pela transmissão desta zoonose (GAST, 1997).
O primeiro relato de salmonelose em aves foi no século passado em um surto de enterite em pombos (MOORE, 1895). A prevalência de sorotipos de salmonelas de aves muda de ano para ano, mas vários sorotipos são constantemente encontrados com alta incidência, tais como, S. Heldelberg, S. Enteritidis e S. Typhimurium (FERRIS & MILLER, 1991, 1992, 1993). A relação entre a contaminação do ambiente com salmonelas e a incidência em pássaros silvestres de vários locais da República Tcheca foi demonstrada em um trabalho realizado por ÜZEK et al. (1994), onde várias fazendas com relatos de salinonelose erri animais de criação foram selecionadas e os pássaros silvestres da região foram examinados. Salmonella Typhimurium foi o sorotipo mais comumente isolado em gaivotas, sendo que o fagotipo 141 representou 32% dos 48 fagotipos encontrados. PALMGREN et al. (1997) investigaram o papel dos pássaros silvestres na transmissão de Salmonella spp. na Suécia, encontrando 2 amostras de S. Typhimurium em 50 gaivotas com resistência múltipla a antibióticos. KAPPERUD et al. (1998) encontraram na Noruega evidências da transmissão de S. Typhimurium (0:4-12) de aves silvestres para seres humanos.
O objetivo deste trabalho foi descrever um caso clínico de mortalidade em araras azuis apreendidas no Aeroporto Internacional de Guarulhos, SP, Brasil.
MATERIAL E MÉTODOS
Histórico do caso
Foram apreendidas 12 araras azuis (Anodorhynchus hyacinthinus) no Aeroporto Internacional de Guarulhos, SP, em fevereiro de 1994, sendo que quatro delas estavam mortas na caixa utilizada para o embarque ilegal. As aves encontradas mortas foram cremadas imediatamente após a apreensão. As demais foram encaminhadas ao Parque Ecológico do Tietê-DAEE para readaptação e soltura. Ao exame clínico observou-se que as aves estavam debilitadas. Após dez dias, um dos espécimes veio a óbito, sendo então necropsiado no Departamento de Patologia-FMVZ-USP.As aves sobreviventes foram submetidas ao tratamento com Danofloxacina a 5 mg/kg de peso vivo (p.v.).
Exame anatomopatológico e histopatológico
A arara foi submetida à necropsia padrão para aves, e os órgãos foram removidos para o exame. bacteriológico e histopatológico, sendo este último realizado com aproximadamente 1 cm3 de tecidos fixados em solução de formaldeído a 10%, em seguida desidratados em solução de álcool, diafanizados em xilol e embebidos em parafina. Cortes de 5 mm foram obtidos e corados com Hematoxilina-Eosina (H&E).
Exame bacteriológico
Os fragmentos de fígado e baço foram colhidos e macerados separadamente e semeados em caldos BHI e tetrationato. Em seguida, foram incubados por 24 horas a 37ºC. Após esse período as culturas do caldo BHI foram semeadas em ágar sangue e as culturas do caldo tetrationato em ágar Mac Conkey e incubados por 24 horas a 37ºC. Após o cultivo no ágar sangue e Mac Conkey obteve-se culturas puras de colônias acinzentadas e lactose negativa, respectivamente. Três destas foram submetidas a testes bioquímicos, como: produção de ácido e gás a partir de glicose, produção de ácido sulfídrico (H2 S),urease, L-triptofano desaminase (LTD), indol, motilidade, utilização de lisina e citrato de Simmons (Entero Kit - Probac do Brasil).
Sorotipagem
A amostra foi cultivada no ágar nutriente para realização da sorologia com antisoro polivalente Anti "O" e "H" (Probac do Brasil) e encaminhada ao Laboratório de Referência Nacional para Salmonella do Instituto Adolfo Lutz, em São Paulo, SP.
Susceptibilidade à drogas antimicrobianas
Após a identificação bioquímica e sorológica, foram selecionadas três (3) colônias obtidas a partir do ágar Mac Conkey para determinação de susceptibilidade à drogas antimicrobianas utilizandose Danofloxacina, Enrofloxacina, Flumequina, Cloranfenicol e Tetraciclina, segundo o método de difusão em ágar, descrito por BAUER et al. (1966).
Coproculturas
Foram realizadas duas coletas com swabs cloacais, no segundo e vigésimo terceiro dia após término do tratamento. Os swabs foram semeados em caldo tetrationato que em seguida foram incubados por 24 horas a 37ºC. Após esse período as culturas foram cultivadas em ágar Mac Conkey e incubadas por 24 horas a 37º C.
RESULTADOS
Observou-se hepatomegalia com focos esbranquiçados dispersos no parênquima, friável ao corte e coloração âmbar; esplenomegalia com focos esbranquiçados; hidropericárdio, petéquias e sufusões em diferentes porções do intestino e edema pulmonar ao exame anatomopatológico.
Nas observações histopatológicas encontrou-se múltiplos focos de necrose no parênquima hepático (Figs. 1 e 3), distribuídos aleatoriamente e caracterizados por material amorfo eosinofílico entremeado por extenso infiltrado inflamatório com predomínio de heterófilos, mas apresentando também, macrófagos e linfócitos (Fig. 2). Acompanhando o infiltrado inflamatório no parênquima hepático, notou-se intensa leucocitose sinusoidal. No intestino grosso notou-se enterite catarral em jejuno e íleo, necrose difusa associada a diversas colônias bacterianas (próximas à submucosa), debris celulares e células inflamatórias. Nos pulmões observou-se congestão moderada.
Houve crescimento de colônias lactoses negativas no ágar Mac Conkey e colônias acinzentadas no ágar sangue, as quais foram submetidas aos testes bioquímicos e apresentaram produção de ácido e gás a partir da glicose, produção de H2 S, de motilidade e utilização de Usina e citrato de Simmons; produção urease, LTD e indol negativos, sendo compatível com Salmonella sp. após o exame sorológico com antisoros polivalentes anti "O" e "H".
Esta amostra foi encaminhada ao Instituto Adolfo Lutz e confirmada como Salmonella enterica subsp. enterica sorotipo Typhimurium (Salmonella Typhimurium).
Fotomicrografia de corte histológico de fígado. Presença de focos de necrose e intenso infiltrado inflamatório disperso no parênquima hepático. Notar perda do padrão arquitetural dos cordões de hepatócitos remanescentes. HE, 34X.
Fotomicrografia de corte histológico de fígado (detalhe da figura 1). Notar histiocitose sinusoidal e infiltrado inflamatório com presença de heterófilos e células mononucleares. HE, 140X.
Fotomicrografia de corte histológico de fígado. Presença de infiltrado inflamatório com predomínio de heterófilos. Observar áreas de necrose caracterizadas pela presença de material amorfo e perda dos limites celulares. HE, 140X.
As coproculturas realizadas nas aves tratadas com Danofloxacina foram negativas para isolamento de Salmonella spp. ao segundo e vigésimo terceiro dia após o término do tratamento.
Nos testes de susceptibilidade a drogas antimicrobianas, a amostra mostrou-se resistente somente à tetraciclina.
DISCUSSÃO
Em aves comerciais, muitos casos de infecções por salmonelas do grupo paratifóides têm sido relatados ao longo dos anos, sendo a S. Typhimurium uma das mais predominantes (PADRON, 1990; FERRIS & MILLER, 1991, 1992, 1993; CRZEK et al., 1994; KAPPERUD et al., 1998).
Acredita-se que as aves silvestres não tenham um papel importante na epidemiologia da salmonelose humana (QUESSY & MESSIER, 1992). No entanto, quando um grande número de aves vivem num mesmo local, elas podem representar um potencial de risco para a saúde do homem e de outros animais (WILSON & MACDONALD, 1997).
Como as aves foram apreendidas no aeroporto e iriam ser contrabandeadas, possivelmente as más condições de transporte, acondicionamento e manejo poderiam ter causado a debilidade destas, proporcionando a manifestação clínica da salmonelose, pois GAST (1997) relatou que apenas em aves muito jovens as infecções por salmonelas do grupo paratifóide estão associadas à doença.
CONCLUSÕES
Os achados dos exames anatomopatológico e histopatológicos foram compatíveis com os descritos na literatura para infecções por salmonelas do grupo paratifóides (PADRON, 1990).
A amostra isolada mostrou-se muito sensível aos antibióticos, sendo somente resistente à tetraciclina. Estes dados corroboram os descritos por TASSROS et al. (1997) que referem como sendo relativamente baixa a freqüência de Salmonella sp. resistentes aos antimicrobianos.
Estudos referentes à sanidade de aves silvestres devem ser incrementados para melhor conhecer-se a disseminação deste patógeno no meio ambiente.
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